Анализ на коклюш — правила сдачи, виды и информативность

Коклюш

Коклюш – острая антропонозная инфекционная болезнь с воздушно-капельным механизмом передачи возбудителя, вызываемая коклюшным микробом и характеризующаяся длительным своеобразным спазматическим кашлем с поражением дыхательной, сердечно-сосудистой и нервной систем. Возбудитель коклюша – Bordetella pertussis – грамотрицательная коккобацилла, относится к роду Bordetella. Помимо B. pertussis респираторные инфекции у людей могут вызывать B.parapertussis и B.bronchiseptica.

B.parapertussis вызывает паракоклюш – заболевание, подобное коклюшу, но с более легким течением. Перекрестный иммунитет в отношении коклюша и паракоклюша отсутствует. B.bronchiseptica вызывает бронхисептикоз (бордетеллез), протекающий как ОРВИ, возникающий при контакте с инфицированным животным, у людей с ослабленной иммунной системой может вызывать пневмонию. Выделяют типичные (кашель имеет приступообразный характер) и атипичные (отсутствует спастический кашель) формы коклюша. В течении типичных форм коклюша различают 4 периода: инкубационный (в среднем 14 дней), катаральный (1–2 недели), период спазматического кашля (4–6 недель) и период разрешения. Выраженность клинических проявлений зависит от тяжести заболевания, оцениваемой по: длительности катарального периода, частоте приступов кашля, наличию цианоза лица при кашле, гипоксии вне приступов кашля, степени нарушения работы сердечно-сосудистой системы, наличию и степени выраженности энцефалических расстройств. Диагноз коклюша считается подтвержденным, если имеется соответствие клиническому стандартному определению случая коклюша, лабораторное подтверждение и/или имеется эпидемиологическая связь с лабораторно подтвержденным случаем. Возможно сочетанное инфицирование с другими возбудителями ОРЗ, что отягощает течение болезни.

Показания к обследованию. Диагностика: больные с подозрением на коклюш и паракоклюш (в соответствии со стандартным определением случая*), а также длительно (5–7 дней и более) кашляющих, независимо от указаний на контакт с больными.

По эпидемическим показаниям: дети и взрослые в детских учреждениях, родильных отделениях и детских больницах, в которых были выявлены больные коклюшем.

Дифференциальная диагностика

  • Острые бронхиты, вызванные Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae, вирусными возбудителями респираторных инфекций;
  • аспирация инородного тела;
  • муковисцидоз;
  • лимфогранулематоз.

Материал для исследований

  • Заднеглоточный мазок – культуральное исследование;
  • носоглоточный мазок – культуральное исследование;
  • мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки – выявление ДНК микроорганизмов;
  • гортанно-глоточные смывы – обнаружение АГ;
  • сыворотка крови – обнаружение АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение чистой культуры бордетелл и определение их видовой принадлежности; выявление ДНК B.pertussis, B.parapertussis, B.Bronchiseptica методом ПЦР, выявление АГ B. pertussis в гортанно-глоточных смывах с использованием РНИФ; обнаружение специфических АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. При выявлении бордетелл выполняют выделение чистой культуры микроорганизмов и определение их видовой принадлежности методами микроскопии, постановкой РА с видоспецифическими сыворотками, проведением биохимических тестов и оценкой подвижности микроба. Культуральный метод характеризуются большой продолжительностью исследования, его диагностическая чувствительность не превышает 10–20%; аналитические характеристики во многом зависят от качества используемых сред (добавление крови животных является обязательным условием) и реагентов для иммунологических и биохимических идентификационных тестов.

Обнаружение ДНК методом ПЦР наиболее эффективно и востребовано для ранней диагностики, наибольшими диагностическими возможностями обладают методики, позволяющие обнаруживать и дифференцировать значимые для человека виды Bordetella с чувствительностью 5 x 10 2 – 1 x 10 3 ГЭ/мл исследуемого материала со специфичностью 100%.

Выявление АТ позволяет диагностировать коклюш на поздних сроках. Обнаружение специфических АТ проводят с использованием: РА для диагностики коклюша и паракоклюша, ИФА для обнаружения АТ (Ig M, A, G) к различным антигенам B.pertussis и B.parapertussis. Выявление специфических IgА методом РНИФ практически не используется по причине отсутствия стандартизации; чувствительность анализа, по данным авторов метода, варьирует в широком диапазоне от 10 3 до 10 5 микробных клеток в 1 мл, при этом положительные результаты исследования можно учитывать только при наличии типичной симптоматики коклюша.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Культуральное исследование с диагностической целью следует проводить в ранние сроки заболевания (1–2 недели болезни); в более поздние сроки высеваемость возбудителя резко снижается. Оптимальное время для обнаружения ДНК методом ПЦР – до 3-х недель от начала заболевания. Определение АТ целесообразно с 3-й по 6-ю недели от начала заболевания, далее титры АТ начинают снижаться. У детей до 6 лет, вакцинированных против коклюша, можно использовать только пробы крови, взятые в динамике (парные сыворотки), причем первый раз кровь берется не ранее чем через 3 недели от начала заболевания, повторно – спустя 2 недели.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Диагноз коклюша считается лабораторно подтвержденным в случае выделения культуры B.pertussis; обнаружения специфического фрагмента генома B.pertussis методом ПЦР; выраженной сероконверсии (увеличение в 4 и более раз уровня специфических IgG и/или IgA в парных сыворотках, или обнаружении у не привитого пациента специфических IgM). Диагностическим титром реакции агглютинации у не привитых и не болевших детей считают разведение 1:80. Необходимо учитывать, что у детей в возрасте до 3 месяцев могут присутствовать материнские АТ, но, как правило, в низких титрах. Диагноз коклюш, вызванный B.parapertussis, ставится в случае выделения культуры B.parapertussis или обнаружения специфического фрагмента генома B.parapertussis методом ПЦР, или при обнаружении АТ методом РА в титре не менее 1:80. Заболевание, вызванное B.bronchiseptica, диагностируется при выделении культуры или обнаружения специфического фрагмента генома методом ПЦР.

* Стандартное определение случая заболевания коклюшем – острое заболевание, характеризующееся: сухим кашлем с постепенным его усилением и приобретением характера приступообразного спазматического на 2-3 неделе заболевания, особенно в ночное время суток или после физической и эмоциональной нагрузки; явлениями апноэ, гиперемией лица, цианозом, слезотечением, рвотой, лейко- и лимфоцитозом в периферической крови, развитием «коклюшного легкого», жестким дыханием, отделением вязкой мокроты; незначительным повышением температуры.

Анализ на коклюш. Цена, как сдавать детям, взрослым, расшифровка

Коклюш — это опасное инфекционное заболевание, которое поражает органы дыхательной системы. Болезнь всегда протекает в острой форме, сопровождается продолжительными приступами сухого лающего кашля. Возбудителем этого недуга является антропонозный микроорганизм Bordetella pertussis, который также обозначается медицинским термином палочка Борде-Жонгу.

Данная инфекция является неподвижной коккобациллой грамотрицательного типа, которая относится к категории строгих аэробов. Заболевание коклюш передается только воздушно-капельным путем, а для обнаружения патогенной бактерии необходимо проводить анализ венозной крови, а также слизистого содержимого ротовой полости.

Средние цены на данный вид лабораторного исследования не превышают показатель в 1250 руб.

Какой делают анализ на коклюш и что он показывает

Анализ на коклюш проводится в специализированных диагностических центрах или биохимических лабораториях, которые укомплектованы современным оборудованием, способным идентифицировать наличие бактерии Bordetella pertussis в составе биологического материала.

Цены на данный вид исследования являются доступными для большинства пациентов со средним уровнем доходов. В таблице ниже представлены основные виды анализов, которые проводятся в процессе диагностики пациента с признаками заражения коклюшем.

Принцип проведения лабораторного исследования

Вид анализа, который целесообразно использовать в конкретной клинической ситуации, определяется в индивидуальном порядке в зависимости от общего состояния больного, а также присутствия специфической симптоматики. В случае необходимости может быть одновременно выполнена серологическая, бактериологическая и ПЦР диагностика.

Когда назначают исследование?

Анализ на коклюш (цена данного обследования не превышает стоимость диагностики на другие виды инфекций) назначается профильным специалистом медиком, который в процессе предварительного осмотра пациента, обнаружил признаки данного заболевания.

Проведение лабораторного исследования на коклюш выполняется в отношении взрослых и детей со следующей симптоматикой:

  • сухой лающий кашель, очередной приступ которого сопровождается спазмом бронхиального дерева;
  • в тот момент, когда больной выполняет вдох, слышен протяжный свист внутри грудной клетки;
  • присутствует рвота, которая возникает без признаков пищевого отравления или химической интоксикации организма;
  • обнаруживается цианоз кожной поверхности, расположенной в области носогубного треугольника (наличие данного симптома указывает на нарушение процесса газообмена, спровоцированного спазмом дыхательных путей);
  • физическая слабость и быстрая утомляемость организма;
  • слезотечение, сопровождающееся непрекращающимся ринитом;
  • акроцианоз;
  • лихорадочное состояние.

Основная опасность коклюша заключается в том, что его симптоматика напоминает большинство других инфекционных заболеваний, поражающих верхние и нижние дыхательные пути. Только своевременное проведение лабораторного исследования позволяет идентифицировать заражение бактерией Bordetella pertussis.

Диагностика на предмет инфицирования коклюшем показана лицам, которые находились в непосредственном контакте с людьми, у которых был подтвержден факт заражения данной болезнью. Этот вид исследования также проводится в научных целях, когда необходимо оценить свойства препарата после выполнения вакцинации пациентов.

Нормы показателей

У людей, которые не заражены бактерией Bordetella pertussis, не являются носителем данного микроорганизма, а также не страдают от острой формы коклюша, результат лабораторного исследования должен быть отрицательным.

При этом не имеет значения, какой именно метод диагностики применялся в конкретном клиническом случае. Обнаружение данного вида бактериальной инфекции не является показателем нормы, а свидетельствует о заражении пациента патогенным микроорганизмом.

Как подготовиться к исследованию

Анализ на коклюш (цена диагностики является доступной для большинства пациентов) проводится в стерильных условиях биохимической лаборатории. Чтобы не допустить получения ложных или искаженных результатов исследования, необходимо соблюсти простые правила подготовки. За 3-4 ч до назначенного времени сдачи биологического материала запрещено выполнять следующие действия:

  • принимать любую пищу;
  • жевать жевательную резинку;
  • сосать леденцы;
  • чистить зубы;
  • ополаскивать ротовую полость антисептическими растворами или пользоваться любыми стоматологическими препаратами;
  • закапывать нос, либо же использовать назальный спрей;
  • курить;
  • полоскать горло;
  • промывать носоглотку и придаточные пазухи носа.

Для получения максимально достоверного результата отбор биологического материала проводится в утреннее время суток, когда человек совсем недавно пробудился ото сна. Вышеперечисленные правила подготовки разъясняются всем пациентам, которым назначено обследование на коклюш. В противном случае возможно получение ложных или искаженных результатов исследования.

Как происходит забор биоматериала

Забор биологического материала, который необходим для проведения анализа на коклюш, происходит непосредственно в диагностическом центре.

Данная процедура предусматривает выполнение следующего алгоритма действий:

  1. Пациент проходит в манипуляционный кабинет, предназначенный для отбора исследуемого материала, а затем присаживается на стул или медицинскую кушетку.
  2. Сотрудник лаборатории берет стерильный ватный тампон для отбора мазков.
  3. Выполняется сбор слизистого содержимого с внутренней стороны щек, горла и носовых каналов.
  4. Для каждого участка исследуемой поверхности используется отдельный тампон.
  5. Каждый из собранных мазков помещается в стерильный пластиковый контейнер, который сразу же закрывается герметичной крышкой.

Мазок из горла на инфекции

Собранный биологический материал в виде слизи из ротовой полости, носа и горла передается в отдел лабораторных исследований, специалисты которого проводят действия по выделению инфекционного возбудителя коклюша.

Забор венозной крови выполняется следующим образом:

  1. Пациент проходит в стерильные условия манипуляционного кабинета, присаживается на кушетку, а затем кладет правую руку на стол для отбора крови, на предплечье которой фиксируется жгут.
  2. После антисептической обработки кожной поверхности медицинский работник выполняет забор крови из полости локтевой вены.
  3. По завершению отбора необходимого количества биологического материала осуществляется изъятие иглы с закрытием участка тканей, которые были повреждены в результате выполнения данных действий.
  4. Собранная венозная кровь сразу же передается для бактериологического, серологического или ПЦР исследования.

После сдачи биологического материала пациент может самостоятельно покинуть стены диагностического центра. Для выполнения анализа на коклюш достаточно 5-10 мл крови в зависимости от того, какое количество методов диагностики будет использовано в конкретном случае.

Сколько ждать результатов исследования?

Лаборатория, которая укомплектована квалифицированным персоналом и современным диагностическим оборудованием, анализ на наличие возбудителя коклюша делает в течение 1-2 дней.

Данного периода времени достаточно, чтобы специалисты медицинского учреждения смогли подтвердить или опровергнуть заражение коклюшем. По результатам лабораторного исследования составляется письменное заключение, которое можно забрать лично, либо же получить в электронном варианте.

Расшифровка ответов анализа

Анализ на коклюш (цена исследования крови или слизистого содержимого ротовой полости зависит от метода диагностики) расшифровывается инфекционистом, пульмонологом или врачом-терапевтом.

Чтобы провести самостоятельную интерпретацию результатов исследования, необходимо сравнить содержание лабораторного заключения с референсными значениями, которые указаны в таблице ниже.

Вид анализаРасшифровка
Серологическое исследование крови на наличие антителВ том случае, если антитела к возбудителю коклюша Bordetella pertussis не обнаружены, результат исследования считается отрицательным. В венозной крови присутствует титр 1:80, являющийся условно-защитным показателем для людей, которые не проходили вакцинацию от коклюша. Титр 1:160 свидетельствует об отрицательном результате у пациентов, которые имеют поствакцинальный иммунитет.
ПЦР диагностика венозной крови, а также слизистого содержимого из ротовой полости, носовых каналов и горлаОтрицательный результат данного анализа на коклюш признается в том случае, если в составе биологического материала не обнаружено фрагментов ДНК инфекционного микроорганизма Bordetella pertussis.

Наличие положительного результата хотя бы одного из вышеуказанных анализов свидетельствует о следующем:

  • пациент болен коклюшем или паракоклюшем;
  • человек является транзиторным носителем инфекционного микроорганизма Bordetella pertussis;
  • развился мощный иммунный ответ, который возник после вакцинации от коклюша.

Во время интерпретации результатов исследования необходимо учитывать возраст пациента, его общее состояние, наличие симптоматики, характерной для коклюша, а также метод диагностики, который использовался для обнаружения Bordetella pertussis.

Причины отклонений показателей от нормы

Обнаружение отклонений показателей нормы при исследовании венозной крови или собранной слизи на наличие возбудителя коклюша требует более детальной диагностики пациента, который проходил обследование.

У детей

У пациентов данной категории основной причиной отклонения от нормы показателей наличия или отсутствия Bordetella pertussis считается особенностью детского организма. У ребенка иммунная система является более слабой, находящейся еще на стадии становления. В связи с этим возможно получение ложноположительного или ложноотрицательного результата.

У взрослых

У взрослых отклонение от нормы показателей на возбудитель коклюша Bordetella pertussis может возникнуть в следующих случаях:

  • пациент контактировал с лицом, которое инфицировано данным заболеванием;
  • произошло естественное снижение иммунологического ответа организма после перенесенной вакцинации;
  • получен ложноотрицательный или ложноположительный результат;
  • ранее выполненная вакцинация от коклюша оказалась неэффективной.

В данном случае лечащий врач предлагает выполнить еще одну сдачу биологического материала, чтобы провести очередное исследование на наличие возбудителя коклюша Bordetella pertussis. Повторный результат исследования считается контрольным.

Что может повлиять на достоверность исследования?

На достоверность результатов анализа на коклюш могут оказать влияние следующие факторы:

  • клиническая стадия развития болезни;
  • наличие вакцинации пациента, которая была сделана в определенный период его жизни;
  • самовольный прием антибактериальных средств терапии;
  • метод диагностического обследования, который применяется в конкретном случае;
  • состояние иммунной системы пациента;
  • несоблюдение правил подготовки перед сдачей биологического материала.

При наличии малейших сомнений в достоверности результатов исследования лечащий врач должен принять решение о проведении повторной диагностики. В данном случае целесообразно использовать несколько методов анализа венозной крови и слизистого содержимого рта, горла, носовых каналов. Например, одновременно проводить ПЦР диагностику и серологическое исследование.

Сколько стоит исследование, где проводят?

Пройти обследование на коклюш можно в государственном или частном медицинском учреждении. В таблице ниже указаны средние цены анализов на Bordetella pertussis.

Вид анализаСтоимость обследования
Серологический1050 руб.
ПЦР1200 руб.
Бактериологический950 руб.

Коклюш — это опасное инфекционное заболевание, которое поражает слизистую оболочку и ткани органов дыхательной системы.

Особенностью данной болезни является то, что она сопровождается длительным лающим кашлем, который вызывает кислородное голодание организма. Для диагностирования этого недуга проводят лабораторный анализ венозной крови и слизи из ротовой полости, гортани, носовых каналов.

Чтобы обнаружить возбудитель коклюша, бактерию Bordetella pertussis, применяют ПЦР диагностику, серологический или бактериологический метод исследования, на проведение которых необходимо 1-2 дня. Цена данных анализов является абсолютно доступной.

Видео об анализе на коклюш

Клинико-микробиологическое сопоставление при коклюше:

Анализы на коклюш и паракоклюш: когда они назначаются и как проводится лабораторная диагностика инфекции

Многие считают, что коклюш — детская инфекция, редко встречающаяся и легко протекающая. В действительности и коклюш, и паракоклюш становятся все более серьезной проблемой в мире из-за тяжелого течения и наличия атипичных, или стертых, форм. В этой статье мы расскажем, как вовремя распознать это непростое заболевание.

Чем опасен коклюш и почему так важна его оперативная диагностика

Коклюш — острое инфекционное заболевание, поражающее преимущественно детский организм и сопровождающееся спазматическим кашлем. Инфекция передается воздушно-капельным путем: при кашле, чихании и даже во время разговора.

Коклюш вызывает бактерия Bordetella pertussis, которая попадает в дыхательные пути и прикрепляется к клеткам эпителия. В результате микроскопические реснички, помогающие выводить мокроту и очищать бронхи, повреждаются. Бактерия начинает размножаться и выделять несколько видов токсинов, которые и приводят к появлению симптомов.

Первый симптом коклюша — ночной кашель. Постепенно он усиливается и появляется днем. Так может продолжаться до двух недель. Со временем состояние ухудшается, кашель становится спастическим, или спазматическим. Во время приступа человек с трудом может вдохнуть, напрягается, лицо становится красным или даже синеватым, появляется ощущение нехватки воздуха. Приступ такого мучительного кашля иногда заканчивается рвотой или выделением очень густой стекловидной мокроты.

Проблема своевременной диагностики заключается в том, что патология начинается с незначительных симптомов. Сухое покашливание ночью или перед сном напоминает кашель при ОРВИ. Температура тела больного может как незначительно повыситься на несколько дней, так и остаться нормальной. Общее самочувствие инфицированного почти не страдает. И только когда появляются более серьезные симптомы, врачи начинают задумываться о полноценной лабораторной диагностике коклюша.

Еще в начале прошлого столетия коклюш считался одной из самых опасных инфекций, он ежегодно становился причиной смерти тысяч детей. Но даже на современном уровне развития медицины коклюш может протекать очень тяжело.

Исследования, проведенные в 2000-е годы, указывают на значительное увеличение за последнее десятилетие доли тяжелых и среднетяжелых случаев коклюша. Если в 1990-х годах регистрировалось только 18,6% тяжелых форм болезни, то в 2000-е — уже 43,2%.

Токсины, которые выделяет возбудитель коклюша, поражают дыхательный центр в головном мозге. Из-за этого возникает нарушение дыхания, в крови становится меньше кислорода, увеличивается содержание углекислого газа. Возникает гипоксия — кислородное голодание. Поражаются сосуды, развивается повреждение головного мозга (энцефалопатия). В крови увеличивается количество лимфоцитов и лейкоцитов.

К осложнениям коклюшной инфекции относят ателектаз легкого (сближение и сжатие стенок легкого, сопровождающееся выходом воздуха с данного участка), кровоизлияния на коже и в конъюнктиву глаза, поражение сосудов, энцефалопатию, легочное сердце. Из-за снижения иммунитета часто присоединяется вторичная инфекция, развивается бронхит или пневмония.

Паракоклюш — острое инфекционное заболевание, вызываемое бактерией Bordetella parapertussis. Она очень похожа по своему строению на возбудитель коклюша и поэтому вызывает практически такие же симптомы.

Раньше считалось, что паракоклюш — более легкое заболевание. Но последние исследования доказали, что он тоже может привести к тяжелому судорожному кашлю, рвоте и нарушению дыхания. Единственное клиническое отличие этого заболевания от коклюша — отсутствие повышения уровня лейкоцитов в крови.

Особо тяжелые последствия наблюдаются при заражении взрослых и подростков. По данным серологических исследований, проведенных в США, 12–21% взрослых с кашлем более 2 недель могут болеть коклюшем. В России ситуация примерно такая же. Согласно исследованиям ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, проведенным в очагах коклюша, после контакта с зараженным заболело 23,7% взрослых.

У подростков и взрослых коклюш часто протекает в атипичной или вовсе бессимптомной форме. При этом родители, старший брат или сестра с «обычным ОРВИ» являются серьезной угрозой для младших детей в семье. Поэтому так важно вовремя выявить инфекцию не только у малышей, но и у взрослых.

Какие анализы нужно сдавать при подозрении на коклюш

Существуют бактериологические, серологические и ПЦР-методы диагностики коклюша и паракоклюша. Биологический метод (посев материала из носоглотки и культивирование его на питательной среде) информативен на раннем этапе. В первые дни болезни он дает достоверный результат в 86–98% случаев. Но со временем показатели точности снижаются до 15–20%. Особенно если ребенок начинает принимать антибиотики.

«Золотым стандартом» диагностики коклюша является реакция иммуноферментного анализа (ИФА). Она позволяет выявить в сыворотке крови различные классы иммуноглобулинов. Это дает возможность врачу точно поставить диагноз, определить стадию инфекционного процесса, узнать насколько силен иммунитет к коклюшу.

Каждый из анализов на коклюш имеет свои особенности, показания, принципы интерпретации результатов. Давайте разберем их все.

Посев отделяемого носоглотки на микрофлору

Этот анализ проводят в катаральном периоде заболевания, то есть в первые дни появления кашля. Исследование назначают после контакта с больным коклюшем, особенно если у ребенка нет прививок или нет данных об их проведении.

Чувствительность теста колеблется в зависимости от качества и сроков исследования от 20 до 90%. При этом анализ выявляет и коклюш, и паракоклюш. В более поздний период заболевания и при приеме антибиотиков его результативность сильно снижается. Исследование проводится натощак, через 2–3 часа после питья или еды. Материал забирают в среднем на 5–7 день заболевания двукратно: два дня подряд или через день. Мазок берется с поверхности ротоглотки.

Биоматериал помещают в специальную емкость и направляют в лабораторию. Там проводится посев материала на питательную среду. Через несколько дней проводится микроскопическое исследование выросших колоний бактерий. Предварительный результат обычно можно получить на 3–5 день, окончательный — на 5–7 день.

Наличие Bordetella в организме говорит или о заболевании коклюшем (паракоклюшем), или о бессимптомном носительстве. Лечение необходимо в любом из этих случаев.

Клинический анализ крови

Исследование проводят при подозрении на инфекционное заболевание, при кашле, повышении температуры и практически при любых заболеваниях. Анализ может дать информацию о наличии воспаления в организме, но что послужило причиной, на его основании сказать нельзя.

Кровь забирают натощак и отвозят в лабораторию. Само исследование проводится или на специальном гемоанализаторе, или с помощью ручного подсчета клеток крови.

Результаты анализа крови при коклюше у детей нельзя анализировать без учета клинической картины и данных других методов исследования. При заражении коклюшной инфекцией значительно повышается количество лейкоцитов и лимфоцитов, при этом скорость оседания эритроцитов (СОЭ) остается в пределах нормы. При паракоклюше повышения лейкоцитов не наблюдается.

Выявление антител к антигенам клеток Bordetella pertussis

При проведении анализа на антитела к коклюшу выявляют три вида иммуноглобулинов — IgA, IgG и IgM.

ИФА назначают при подозрении на коклюш, часто на поздних стадиях болезни, когда бактериологическое исследование уже неэффективно. То есть начиная со 2-3 недели заболевания. Диагностическая чувствительность этого метода — 66,6%, специфичность — 100%.

Забор крови проводится натощак, не раньше чем через 4 часа после последнего приема пищи. После этого из крови выделяют сыворотку, которая и является материалом для исследования. Собранный материал отправляется в лабораторию, где проводится серологический анализ на коклюш методом ИФА.

Исследование может быть как качественным (положительный/отрицательный результат), так и количественным (например, «титр 1:160»). Антитела IgM появляются в острой стадии коклюша примерно со второй недели заболевания. На 2–3 неделе обнаруживается IgA. На третьей неделе начинают образовываться антитела IgG. Именно они ответственны за формирование стойкого иммунитета. Интерпретировать результаты можно только в соответствии с клинической картиной, учитывая эпидемиологические и другие данные.

ПЦР-тестирование

Исследование можно проводить в течение первых 4-х недель заболевания. Чувствительность этого теста превосходит бактериологическое исследование во много раз. Специфичность метода —100%.

Мазок берется из носа или из ротоглотки. Забор материала желательно проводить натощак или через 2-3 часа после питья и еды. Предварительно полоскать рот не нужно.

В лаборатории в забранном материале определяются специфические участки ДНК бактерии, которая вызывает коклюш. Положительный результат говорит о заболевании коклюшем или о бактерионосительстве.

Не стоит самостоятельно выбирать тип анализа на коклюш, необходимо проконсультироваться со специалистом. И помните, на результат исследования влияет качество подготовки и проведения: техника взятия материала, условия транспортировки, состояние питательных сред.

Стоимость анализов на коклюш в частных клиниках

В среднем определение каждого типа иммуноглобулинов обойдется в 700–850 рублей. Бактериологический анализ на коклюш будет стоить уже дороже — от 850 до 1400 рублей. Ценовая разница при ПЦР-тестировании составляет от 300 до 800 рублей.

При этом стоит учесть расходы на взятие анализа крови (100–150 рублей) или мазка (200–250 рублей). Дополнительно клинический анализ крови с определением СОЭ будет стоить примерно 400–460 рублей.

Анализ на коклюш — правила сдачи, виды и информативность

Опыт многолетних исследований показывает, что лабораторные анализы на коклюш одинаково эффективны в отношении малышей и взрослых, привитых и невакцинированных пациентов. Современная медицина научились довольно точно распознавать неустойчивую и прихотливую бактерию, что заметно упрощает диагностику самых сложных случаев недомогания со стертой симптоматикой.

Насколько информативны анализы на коклюш

Достоверность и информативность тестов во многом зависит от качества подготовки и времени сдачи анализов. Для каждой из методик существует свой период забора, когда выявляемые компоненты наиболее активны. При соблюдении всех условий исследования на коклюш очень содержательны и дают исчерпывающие сведения о заболевании.

Не менее важно для информативности и место, где выполняется диагностика. Если общий анализ крови можно с одинаковым успехом сделать как в частной, так и в муниципальной клинике, то специфические тесты при коклюше лучше сдавать в платных учреждениях. Несмотря на высокую достоверность исследований, в городских поликлиниках правильный диагноз устанавливается только в половине случаев. Остальные пациенты лечатся от пневмонии, бронхита, ОРВИ и т. д.

Какие анализы сдают на коклюш

Какие анализы сдают на коклюш? В большинстве случаев больным назначают ряд специфических тестов: молекулярно-генетический, серологический и бактериологический. Каждая из этих методик дает верный результат в 95–98% случаев. Из общих наиболее распространен ОАК.

Обычно для подтверждения недомогания не требуется выполнять все исследования сразу. Доктор, исходя из симптоматики и продолжительности недуга, решает, какие именно анализы необходимо сдать на коклюш.

Общий анализ крови на коклюш

Клинический анализ крови назначают всем пациентам без исключения для обнаружения воспалительного процесса, силы и продолжительности его течения, но определить по нему наличие коклюша невозможно. Данный тест не относится к специфическим и имеет диагностическую значимость лишь в совокупности с другими клиническими признаками недомогания. Анализ крови может только навести врача на мысль о коклюше, но не более того.

Биоматериал для ОАК берут с утра, на голодный желудок. Забранный образец изучается с помощью гемоанализатора, но если в результате обработки обнаруживаются аномалии, выполняется ручной подсчет компонентов.

Какие показатели типичны для заболевания? Как правило, в анализе крови при коклюше заметно возрастает концентрация лейкоцитов — до 20–40*10 9 /л. У младенцев эти значения могут быть несколько ниже — 15–30*10 9 /л. При этом СОЭ остается на прежнем уровне. Исследование проводят только по направлению врача.

Стоимость анализа крови с оценкой количества лейкоцитов и СОЭ не превышает 450 рублей.

Посев отделяемого из носоглотки

Самый капризный и наиболее информативный тест в катаральном периоде коклюша. Его делают только те клиники, где хорошо отлажен процесс доставки и хранения биоматериала. Анализ назначают не позднее третьей недели болезни, обычно дважды, с промежутком в 1–2 дня.

Достоверность теста зависит от сроков посева, разновидности используемых сред, соблюдения правил забора отделяемого. По истечении двадцати суток информативность анализа падает до 20%. Влияет на надежность исследования и прием антибиотиков. Противомикробные лекарства нарушают жизнедеятельность патогенов и ухудшают высеваемость.

Сколько делается культуральный анализ на коклюш? Предварительные сведения могут быть готовы уже на третьи сутки, но они редко несут достоверные данные. Окончательный результат выдают на 6–7 день.

Чтобы увеличить информативность бак-посева на коклюш, перед посещением процедурного кабинета нельзя пить и употреблять пищу, чистить зубы, полоскать горло, рассасывать пастилки от кашля или использовать аэрозоли. У взрослых биоматериал на анализ забирается заднеглоточным тампоном — слизь снимают с миндалин и берут из носа. Для детей чаще используют вариант «кашлевых пластинок». Для этого чашку с питательным субстратом подносят ко рту малыша и просят покашлять.

Расшифровать данные бак-анализа на коклюш очень просто — колонии Bordetella либо присутствуют в пробирках и чашках со средой, либо нет. В последнем случае говорят об отрицательном результате. В некоторых посевах из зева детей могут быть получены микроорганизмы, сходные по своим морфологическим и серологическим качествам с бактерией коклюша. Тогда назначается дополнительный тест с реакцией иммуноэлектрофореза.

Сколько стоит подобный анализ для детей и взрослых? Цены на посев возбудителя коклюша не зависят от возраста пациента и колеблются от 900 до 1500 рублей.

Анализ ПЦР на коклюш

Самым трудоемким считается ПЦР-анализ на коклюш. Исследование информативно целый месяц с начала недомогания, дает 100% результат и наиболее эффективно у малышей раннего возраста, но отличается сложностью забора биоматериала. Врачу нужно исхитриться и взять как можно больше слизи, содержащей бактерии коклюша.

Соскоб снимают со слизистой носа или ротоглотки, стараясь проникнуть тупфером как можно глубже. Затем тампон помещают в термоциклер и с помощью комплекта реактивов обнаруживают ДНК возбудителя. Для получения качественного анализа за 2 часа до забора биоматериала нельзя есть и пить, в течение 5 часов перед тестом запрещено орошать горло или пользоваться пастилками.

Сколько готовится молекулярный анализ на коклюш? Данный метод диагностики недаром называют экспресс-тестом — расшифровку можно получить в течение ближайших суток. Делают его в любой лаборатории по вполне демократичной цене — от 500 до 800 рублей за тест.

Положительный результат анализа на коклюш говорит о том, что в крови пациента присутствуют следы возбудителя. Некоторые клиники указывают количественное значение патогенов.

Выявление антител

Считается самым надежным анализом на коклюш и позволяет диагностировать болезнь на поздних этапах, когда другие методы уже неэффективны. Среди медиков этот тест называется «золотым стандартом», дает 100% специфичность и диагностическую чувствительность не менее 66%.

Биоматериал для анализа у взрослых берется из вены (3–4 мл), у детей из подушечки среднего пальца (0,5–1,0 мл). Процедура выполняется в первой половине дня, строго натощак. Собранную кровь направляют в лабораторию, где ее обрабатывают методом ИФА.

Тест на антитела к коклюшу бывает качественным или количественным. При проведении анализа определяют 3 класса маркеров — IgA, IgG и IgM. Антитела типа А и М характерны для первичной инфекции и начинают образовываться с двадцатого дня заболевания, а еще через 7 суток появляются антитела уровня G. Они же обнаруживаются после вакцинации и остаются в крови на долгие годы.

О положительном результате можно говорить, если в расшифровке ИФА-анализа на коклюш указаны следующие значения:

  • IgA — более 26 ед./мл;
  • IgM — более 18 ед./мл;
  • IgG — более 18 ед./мл.

При слабом иммунитете или истощении организма анализ может дать ложноотрицательный ответ. В любом случае через 2 недели тест рекомендуется выполнить повторно. Увеличение иммуноглобулина класса G в четыре раза однозначно укажет на развитие коклюша.

Сдать серологический анализ можно в любой клинике. Определение каждого класса титров обойдется в 850 руб. К данной сумме нужно прибавить расходы на забор крови. Это еще примерно 100–130 рублей.

Почему важно вовремя диагностировать заболевание

Еще сто лет назад коклюш считался смертельно опасным недугом. От него умирал практически каждый заболевший ребенок. Сегодня положение намного улучшилось, однако Bordetella pertussis по-прежнему доставляет немало проблем.

Токсины, которые производит возбудитель коклюша, отравляют весь организм, вызывают нарушение дыхания и связанную с этим гипоксию. При резком увеличении уровня углекислого газа в крови создаются все условия для развития энцефалопатии. Особенно тяжело переносят коклюш младенцы.

При поздней диагностике и неграмотном лечении у малышей возникают серьезные нарушения со стороны респираторной системы — может произойти спадение доли легкого, развиться пневмония, тяжелый бронхит, астма. Нарушается деятельность сердечно-сосудистой и нервной систем, во время сильного кашля появляются кровоизлияния в кожу и конъюнктиву глаз, возникает рвота.

Кроме того, что пациент мучается сам, в первые недели коклюш очень заразен и представляет серьезную угрозу для окружающих. При раннем выявлении недуга появляется шанс остановить развитие бактерий и снизить вирулентность болезни до минимума. К преимуществам раннего обнаружения недуга можно отнести и быстрое выздоровление правильно пролеченных детей и взрослых.

Диагностика коклюша основана на множестве лабораторных данных. Каждый анализ по-своему информативен и необходим в строго определенный период. При расшифровке результатов следует учитывать особенности иммунитета у новорожденных, наличие вакцинации и прием антибиотиков. Все эти факторы могут несколько исказить показатели, поэтому не стоит заниматься интерпретацией анализов самостоятельно. Лучше доверить расшифровку специалисту — педиатру либо участковому терапевту.

Автор: Елена Медведева, врач,
специально для lechim-gorlo.ru

Полезное видео про коклюш

Список источников:

  • Диагностика типичного случая инфекционной болезни (стандартизованный пациент): учебное пособие /Н. Д. Ющук, Е. В. Волчкова // Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2017.
  • Диагностическая ценность метода ИФА при коклюше у детей / Попова О. П., Скирда Т. А., Федорова И. М. и др. // Детские инфекции, 2016.
  • Коклюш: эпидемиология, биологические свойства bordetella pertussis, принципы лабораторной диагностики и специфической профилактики / Тюкавкина С. Ю., Харсеева Г. Г. // Эпидемиология и инфекционные болезни, 2014.
  • Ценева Г. Я., Курова Н. Н. Микробиологическая характеристика возбудителя коклюша и лабораторная диагностика // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия, 2003.
  • Руководство по лабораторным методам диагностики / А. А. Кишкун, д. м. н., проф. // ГЭОТАР-Медиа, 2007.

Лабораторная диагностика коклюша

На сегодня болезнь также является довольно опасной. Ежегодно около 300 000 людей умирает от этой патологии. Смертельными являются осложнения болезни, которые чаще наблюдаются у пациентов детского и преклонного возраста, в силу анатомо-физиологических и иммунных особенностей. Это говорит о том, насколько важно знать симптомы болезни и особенности лечения.

Особенности симптомов зависят от периода болезни. Они бывают следующие:

Рассмотрим их подробнее.

Инкубационный период длится с момента поступления возбудителя в организм до появления первых симптомов. Как правило, это от 3 до 20 суток. За это время дыхательные пути поражаются возбудителем настолько, что организм перестаёт компенсировать состояние и начинается клиническая картина болезни.

Катаральный период соответствует степени поражения организма патогенным агентом, а значит развивается постепенно. Пациент даже не может сразу определить начало болезни, настолько размытыми являются первые симптомы. Первый знак – сухой кашель или даже небольшое откашливание. Может быть насморк, при котором из носовых ходов выделяется слизь в незначительном количестве. Пациенты младшего возраста более тяжело переносят этот период, так как их анатомическое строение дыхательных путей способствует более быстрому развитию болезни. В целом, начало болезни напоминает ОРВИ, что часто сбивает с толку как пациентов, так и специалистов. Кашель постепенно становится все сильнее, к нему присоединяется раздражительность и беспокойное состояние пациента.

Далее развивается период спазматического кашля, что, обычно, совпадает с 2 неделей катарального периода. Длительность этого отрезка болезни – несколько недель, 3-4. В это время наблюдаются наиболее яркие проявления болезни, а именно спазматический кашель, который возникает приступами. Перед приступом появляются его предвестники – дискомфорт и першение в горле, чувство сдавливания в грудной клетке, паника и беспокойство. Время возникновения приступов может быть разным, нередко они беспокоят ночью.

Как распознать приступ кашля? Он состоит из сильных толчков, которые сменяют судорожные вдохи. Такой вдох сопровождается слабым стоном и свистом и называется репризой. Этот звук возникает при прохождении воздуха через сильно суженные дыхательные пути. По окончанию приступа у пациента начинает отходить вязкая прозрачная мокрота.

Если болезнь доходит до тяжёлой степени, могут появляться рвота, судороги, тахикардия, дыхательная недостаточность.

Внешне такой приступ сопровождается отёчностью тканей лица, цианозом, набуханием сосудов шеи. Может наблюдаться покраснение глаз, в повышенном количестве отходит слюна и слёзная жидкость.

Между приступами кашля ребёнок находится в нормальном состоянии, играет, кушает с аппетитом, не испытывает какого-либо дискомфорта. Из характерных симптомов, которые бывают при коклюше: язва белого цвета на уздечке языка, которая бывает при его повреждении зубами, кровоизлияния в конъюнктиву, склонность к носовым кровотечениям.

Стадия разрешения болезни постепенно сменяет предыдущий этап. Кашель возникает все реже, становится менее специфичным, исчезают приступы и репризы. Пациент становится слабым, астеничным, ощущает раздражительность и усталость. Это состояние истощённости может удерживаться некоторое время после болезни.

Период восстановления или реконвалесценции занимает около полугода. Пациент устаёт при физических нагрузках, детям трудно даются уроки, наблюдается капризность и эмоциональная лабильность. В этот период несколько снижена иммунная функция организма и пациент становится более склонный к ОРВИ, во время которых опять возникает типичный кашель для коклюша.

Такие периоды характерны для типичной клинической картины коклюша. Но есть и атипичные формы заболевания. Это абортивная и стёртая форма. Они могут наблюдаться у тех, кто вакцинирован, а также у взрослых, чей иммунитет более развит, чем у детей и пожилых людей.

Стёртая форма сопровождается обычным сухим кашлем, который не проходит на фоне приёма противокашлевых средств. Характерных приступов при этом нету. такой кашель может беспокоить пациента от нескольких недель до нескольких месяцев, однако состояние остаётся стабильным, осложнения не проявляются.

Абортивная форма характеризуется молниеносным течением, при котором симптомы внезапно появляются и так же внезапно проходят через несколько дней.

Когда необходима диагностика коклюша?

Показаниями к диагностике коклюша являются клинические проявления болезни, которые необходимо подтвердить или опровергнуть. Так как патология имеет инфекционный характер, постановка диагноза на основе клинических данных невозможны – необходимы результаты лабораторного исследования. Если у пациента есть характерные приступы кашля – анализ обязателен.

Существуют также эпидемические показания к диагностике. Необходимо сдавать анализы всем лицам, которые посещают или находились в детских учреждениях, больницах, родильных отделениях, где были обнаружены пациенты с коклюшем и есть риск заражения.

Кроме того, диагностика требуется для дифференциального диагноза при таких состояниях, как муковисцидоз, инородное тело дыхательных путей, астма, острые бронхиты, лимфогранулематоз, корь, пневмония, ОРЗ.

Современные методы диагностики патологии

На сегодня используются такие методы исследования:

Рассмотрим подробнее эти виды диагностики.

Исследование проводится на 5-7 день болезни, именно в это время оно обладает наибольшей информативностью. Также следует учесть то, что лучше всего проводить забор материала до начала приёма антибактериальной терапии, иначе результат может быть ложноотрицательным. Перед сдачей анализа нельзя принимать пищу, полоскать рот, пить, чистить зубы. Забор материала проходит с задней стенки глотки с помощью специального тампона. Иногда к пациенту подносят посуду с питательной средой во время кашля. Полученный материал сеют на питательный среды, которые подходят для жизнедеятельности и роста микроорганизма. Через несколько суток после получения материала можно сделать предварительной заключение, а через неделю – точный результат анализа.

Серологический метод

Данная методика применяется на более поздних сроках болезни, через несколько недель после появления характерных симптомов. К этому времени бактериологический метод теряет свою эффективность, так как возбудитель практически исчезает из дыхательных путей, а вот антитела к нему циркулируют по организму. Определяются титры антител к патогену и их тип. Различают три класса иммуноглобулинов, М, А и G. Антитела класса М появляются на 2 неделе заболевания, иммуноглобулины А говорят о том, что болезнь развивается больше 2-3 недель, а иммуноглобулины G можно обнаружить после 4 недель болезни.

Иммуноферментный метод

Это основной метод из серологической диагностики. Для исследования требуется венозная кровь. Полученный материал соединяют с лабораторным реактивом, который содержит патоген. Если в крови есть антитела, происходит возникновение иммунокомплекса, что говорит о наличии заболевания. Перед сдачей анализов пациент не должен принимать пищу, медикаменты, подвергаться физическим нагрузкам. Проводится исследование парных сывороток, промежуток между которыми от 10 до 14 дней. Результаты получают на основе прироста титра антител, что говорит о дальнейшем развитии патологии и позволяет исключить тот факт, что антитела появились в результате вакцины или ранее перенесённой болезни.

Метод полимеразно-цепной реакции – наиболее современный и качественный способ подтверждения или исключения диагноза. Для реакции необходимо сдать кровь. В лабораторных условиях проводится её исследование на предмет фрагментов аминокислот генетического материала возбудителя. Далее подтверждается или исключается принадлежность полученной структуры именно к тому типу возбудителя, который вызывает коклюш. Для анализа требуются специфические дорогостоящие реактивы и соответствующее оборудование лаборатории, а также навыки персонала.

Гематологический анализ

Имеется в виду обычный анализ крови, который не обладает специфическими результатами. На его основе можно только уверенно сказать про наличие воспалительного процесса бактериального генеза, так как наблюдается лейкоцитоз с типичным сдвигом лейкоцитарной формулы. Такой результат может стать началом лабораторной диагностики, на основе которого врач сделает следующие назначения.

Схема диагностического исследования

Схема диагностики отличается по возрасту пациента, а также по наличию прививки от болезни.

Схема диагностики для тех, кто не прививался:

в первые две недели болезни эффективно проведение бактериологического обследования или ПЦР;

на 3-4 неделе болезни применяют ПЦР или серологическое исследование;

более 4 недель болезни – показание для серологического обследования.

На фоне приёма антибиотиков применяется ПЦР.

Для привитых лиц применяется такая схема обследования:

на 1-2 неделе болезни – метод ПЦР, бактериологический анализ;

на 3-4 неделе используют ПЦР;

срок болезни более 4 недель требует серологической диагностики.

Расшифровка результатов

Результаты бактериологического метода однозначны: наличие микроорганизмов в материале говорит о том, что именно они являются причиной патологии.

Гематологический метод является неспецифичным, диагностическое значение имеет повышение лейкоцитов более чем 9·109/л.

Результаты ПЦР являются положительными, если в организме есть фрагменты генетического материала бактерии.

Результаты серологической диагностики расшифровываются следующим образом:

менее 10,0 – отрицательный результат, отсутствие антител. Такой результат может быть у здорового человека или у пациента, который заболел менее, чем три недели назад;

от 10,0 до 50,0 – слабоположительная реакция, недостоверный результат, который требует повторной диагностики;

более 50,0 – реакция положительная, антитела обнаружены. Такой результат говорит о том, что человек болен или недавно перенёс коклюш.

Основные аспекты профилактики и лечения болезни

Профилактика коклюша заключается в плановой вакцинации. Применяется вакцина АКДС, которая содержит компоненты против коклюша, дифтерии и столбняка и применяется в возрасте 3, 4, 5, 6 месяцев, а после этого в 1,5 и 6 лет. Существует также экстренная профилактика, которая заключается в введении специфического иммуноглобулина после контакта непривитого ребёнка или ребёнка до года с носителем бактерии.

Вакцина обладает высокой эффективностью, однако она не исключает возможного заболевания. Обратите внимание на то, что болезнь в таком случае будет более лёгкой формы, не принесёт осложнений, а также не приведёт к тяжёлым последствиям, ограничившись лишь стёртыми симптомами болезни. Вакцина необходимо не столько для предотвращения самой болезни, сколько для профилактики её тяжёлого течения и смертельных осложнений. Неспецифическая профилактика заключается в соблюдении эпидемических мероприятий в коллективе, где есть случаи заболевания, ограничении контакта с носителями микроорганизма, санитарно-гигиеническими мероприятиями.

Лечение проводится в амбулаторных условиях для пациентов с лёгким течение болезни, а госпитализируют тех, кто тяжело переносит болезнь, детей маленького возраста. Применяется антибактериальная терапия, глюкокортикоиды, антигистаминные средства, витамины, препараты, которые влияют на дыхательную функцию. В тяжёлых случаях требуется дополнительное введение кислорода, ноотропов, психостимулирующих препаратов.

Причины пройти диагностику в СЗЦДМ

Лаборатория центра оснащена новейшим диагностическим оборудованием. Анализы выполняются быстро и качественно. В штате медицинских центров работают высококвалифицированные специалисты, что позволяет сделать диагностику разносторонней и эффективной. Пациент может не только установить факт заболевания, но и пройти расширенную проверку организма, а также лечение. Для наших врачей нет заболевания отдельной системы – они оценивают полноценное состояние пациента и лечат его, а не патологию. Есть возможность получить результаты исследования на личную электронную почту или получить их в распечатанном виде в медицинском центре.

Анализ на коклюш — какой сдать?

Для диагностики коклюша в современное время доступно большое количество тестов и анализов, но как правильно выбрать необходимый и самый точный из них?

Итак, многие специалисты по всему миру рекомендуют:

Если кашель у подростков и взрослых длится менее двух недель, а у детей менее трёх недель то, целесообразно воспользоваться микробиологическими методами (посев) или методами амплификационной диагностики (полимеразно-цепная реакция, ПЦР) [1,2].

Если кашель у детей и взрослых длится более двух недель и в течение текущего года не проводилась вакцинация против коклюша то, целесообразно воспользоваться серологическими методами диагностики (например, иммуноферментным анализом, ИФА) [1,2].

Теперь немного подробнее о важных особенностях каждого метода.

1. Полимеразно-цепная реакция (ПЦР).

Необходимый материал для анализа — назофарингеальный мазок, но предпочтительнее использовать образец слизи из носоглотки [3]. Как правильно выполнить мазок представлено в нашем канале в телеграме (@pediatrics_rus).

ПЦР необходимо проводить в течение первых двух-трёх недель от начала кашля, так как спустя четыре недели от начала заболевания количество бактерий B.pertussis в носоглоточном секрете стремительно снижается, также количество бактерий снижается, если проводилась антибактериальная терапия (более 5 дней [4]).

У младенцев и ранее не привитых детей ПЦР допустимо выполнять в течение первых четырёх недель от начала кашля [4,5].

Для большей точности ПЦР всегда рекомендуется проводить параллельно с посевом [1], следовательно, при заборе материала следует брать два образца одномоментно — один для ПЦР, другой для посева. Зачем? ПЦР может давать ложноположительные результаты, так как определяет только наличие или отсутствие ДНК возбудителя, а не наличие живых форм [6].

При заборе ПЦР рекомендуется пользоваться палочками из нейлона, рэйона и полиэстера. При использовании хлопковой ваты возбудитель гибнет [7].

При подозреваемом коклюше важно проводить дифференциальную диагностику с аденовирусной, бокавирусной инфекциями, гриппом, парагриппом, M.pneumoniae, Chlamydia trachomatis, Chlamydia pneumoniae и прочими инфекциями [8].

ПЦР не рекомендуется проводить лицам, контактировавшим с больным коклюшем при отсутствии каких-либо симптомов [7].

2. Посев.

Посев на питательную среду — золотой стандарт диагностики коклюша [1—4].

Высокая вероятность получения наиболее точного результата отмечается у лиц, страдающих кашлем менее двух недель, если для лечения ещё не применялись антибактериальные препараты и, если вакцинация против коклюша проводилась более 12 месяцев назад [4].

Необходимый материал для проведения посева — отделяемое носоглотки.

Возбудитель коклюша — B.pertussis является очень чувствительным и привередливым микроорганизмом, поэтому рекомендуется, чтобы медперсонал строго следовал инструкции и соблюдал технику забора материала для анализа.

В среднем результат посева может быть готов через 4—10—14 дней [9,10], всё зависит от возможностей лаборатории. У ранее не болевших и не привитых против коклюша предварительный результат посева может быть готов уже через 72—96 часов [9,11].

Большим преимуществом посева является то, что можно определить чувствительность микроорганизма к антибиотикам и, следовательно, правильно подобрать препараты для последующего лечения. Кроме того, по данным посева, можно определить, какой конкретно штамм бактерии циркулирует на определённой территории и оценить эффективность применяемой вакцины [12].

3. Иммуноферментный анализ (ИФА).

В случае поздней диагностики, когда кашель длится более 3—4 недель и/или уже начата или проведена антибиотикотерапия, для лабораторного подтверждения коклюша можно воспользоваться серологическими методами диагностики, например, иммуноферментным анализом (ИФА).

При помощи ИФА можно определять антитела классов IgM, IgA и IgG к различным антигенам возбудителя: коклюшному токсину (PT), филаментозному гемагглютинину (FHA), пертактину (PRN). Наиболее специфичным антигеном является коклюшный токсин, так как это единственный антиген, который характерен только для B.рertussis [12]. Остальные антигены могут присутствовать и у других представителей Bordetella.

У 25% младенцев и 10% подростков антитела к коклюшному токсину (РТ) могут отсутствовать [2,3].

Серологическое исследование для диагностики коклюша можно использовать с 3 до 12 недель с момента начала кашля [13,14]. Материалом для исследования является кровь.

Лабораторная диагностика коклюша и рекомендуемые временные интервалы для выполнения различных анализов

Какой класс антител лучше определять?

1. Антитела класса IgM.
  • Свидетельствуют об остром инфекционном процессе.
  • Образуются не раньше второй недели от начала заболевания, следовательно, их определение раньше этого срока нецелесообразно [9,14].
  • У некоторых детей и взрослых независимо от наличия вакцинации или перенесённого ранее заболевания антитела класса IgM могут вырабатываться в малом количестве и не определяться по данным анализа [9].
  • Если определение IgM проводилось в первые две недели от начала заболевания и результат был отрицательным, то рекомендуется повторить анализ спустя 10—14 дней. Если отрицательный результат получен спустя 14 дней от начала заболевания, то смысла переделывать анализ нет, так как с течением времени количество IgM только уменьшается.
2. Антитела класса IgG.
  • Обнаруживаются на третьей неделе от начала заболевания, достигают своего наибольшего значения на 6—8 неделе болезни, после чего их уровень постепенно снижается [9].

Определение специфических IgG является наиболее распространённым и стандартизированным методом при серологической диагностике коклюша [2,3]

  • Для более точной диагностики при определении IgG рекомендуется использовать парные сыворотки, так как по данным одного анализа сложно сделать достоверный вывод, ведь неизвестно с чем связано присутствие IgG — с заболеванием или проведенной ранее вакцинацией.
  • Рекомендуемый интервал между исследованиями составляет 10—14 дней. Результат считается положительным при нарастании титра в 2—4 и более раз [3,9,15].

Определение титра антител — оптимальный метод диагностики коклюша у ранее иммунизированных подростков и взрослых [1,9].

Определение IgG рекомендуется, если в течение текущего года (12 месяцев) не проводилась вакцинация против коклюша [1,9].

  • При исследовании однократно взятой сыворотки (даже у ранее привитого более 12 месяцев назад взрослого или ребёнка) результат по обнаружению антител класса IgG может быть расценен как положительный только в случае высокого титра (точное значение необходимо уточнять в лаборатории, так как данные разнятся в зависимости от техники анализа и используемых реагентов) [14].

Во вкладке «Дополнительные материалы» ниже можно скачать памятку об особенностях лабораторной диагностики коклюша в формате pdf.

4. Клинический анализ крови.

В общем анализе крови при коклюше характерно увеличение количества лейкоцитов и лимфоцитов [1—4]. Количество лимфоцитов увеличивается под действием токсина коклюшной палочки [2], однако отсутствие повышения лейкоцитов не исключает коклюш. Клинический анализ крови является только дополнительным методом диагностики [5].

Имеются данные, что если по результатам клинического анализа крови у ребёнка определяется более 10 000 лейкоцитов в 1 мкл и более чем 50% из них составляют лимфоциты, то диагноз коклюша можно рассматривать как вероятный (конечно, при наличии характерной клинической картины) [16]. Если в повторном анализе — через 24 часа — отмечается повышение лейкоцитов более 20 000 в 1 мкл и из них более чем 50% лимфоцитов, то это свидетельствует о том, что вероятность коклюша крайне высока [16].

При оценке клинического (общего) анализа крови у маленьких детей также следует помнить, что если в течение беременности мама младенца прививалась от коклюша, то повышения лейкоцитов может и не быть [16].

5. Дополнительные обследования.

В связи с риском развития осложнений у детей первого года жизни в случае госпитализации рекомендуется выполнять рентгенографию органов грудной клетки (из-за риска пневмонии) и эхокардиограмму (из-за риска лёгочной гипертензии). Остальные исследования — по показаниям.

Подробнее о симптомах коклюша и его лечении можно прочитать в наших статьях по тегу #коклюш.

На этом всё. Статья окончена.

Список источников и дополнительные материалы находятся ниже в секции «Информация к статье».

Поделиться ссылкой на статью:

Информация к статье:

[1] American Academy of Pediatrics. Pertussis (Whooping Cough). In: Kimberlin DW, Brady MT, Jackson MA, Long SS, editors. Red Book: 2018-2021 Report of the Committee on Infectious Diseases. 31th ed. American Academy of Pediatrics; 2018. pp. 620—34.

[2] Cherry JD, Heininger U. Pertissis and other Bordetella Infections. Cherry J, Demmler-Harrison GJ, Kaplan SL, Steinbach WJ, Hotez PJ, editors. Feigin and Cherry’s Textbook of Pediatric Infectious Diseases. 8th ed. Elsevier; 2019. pp.1721-52.

[3] Waters V, Halperin SA. Bordetella Pertussis. In: Bennett JE, Dolin R, Blaser MJ, editors. Mandell, Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases. 9th edition. Elsevier; 2020. pp. 2793—2802.

[4] Faulkner A, Skoff T, Cassiday P, Tondella ML, Liang J. Pertussis. In: Roush SW, Baldy LM, Kirkconnell Hall MA, editors. Manual for the Surveillance of Vaccine-Preventable Diseases. Centers for Disease Control and Prevention; 2017. Chapter 10.

[5] Centers for Disease Control and Prevention. Epidemiology and Prevention of Vaccine-Preventable Diseases. Hamborsky J, Kroger A, Wolfe S, eds. 13th ed. Washington D.C. Public Health Foundation, 2015.

[6] Souder E, Long SS. Pertussis in the Era of New Strains of Bordetella pertussis. Infect Dis Clin North Am. 2015 Dec;29(4):699-713. doi: 10.1016/j.idc.2015.07.005.

[7] Best Practices for Healthcare Professionals on the Use of Polymerase Chain Reaction (PCR) for Diagnosing Pertussis. Pertussis (Whooping Cough). Center for Disease Control and Prevention. Available at: https://www.cdc.gov/pertussis/clinical/diagnostic-testing/diagnosis-pcr-bestpractices.html. Updated: 2017.

[8] Heininger U. Update on pertussis in children. Expert Rev Anti Infect Ther. 2010 Feb;8(2):163-73. doi: 10.1586/eri.09.124.

[9] Диагностика коклюша и паракоклюша: Методические рекомендации.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2013.—56 с.

[10] Wood N, McIntyre P. Pertussis: review of epidemiology, diagnosis, management and prevention. Paediatr Respir Rev. 2008 Sep;9(3):201-11; quiz 211-2. doi: 10.1016/j.prrv.2008.05.010.

[11] Snyder S, Fisher D. Pertussis in Childhood. Pediatrics in Review 2012;33;412. DOI: 10.1542/pir.33-9-412.

[12] Guiso N. How to fight pertussis? Ther Adv Vaccines. 2013 Jul; 1(2): 59–66.doi: 10.1177/2051013613481348.

[13] Diagnosis Confirmation. Pertussis (Whooping Cough). Center for Disease Control and Prevention. Available at: https://www.cdc.gov/pertussis/clinical/diagnostic-testing/diagnosis-confirmation.html. Updated: 2017.

[14] СП 3.1.2.3162-14 «Профилактика коклюша», 2014.

[15] Cornia PB, Hersh AL, Lipsky BA, Newman TB, Gonzales R. Does This Coughing Adolescent or Adult Patient Have Pertussis? JAMA. 2010;304(8):890–896. doi:10.1001/jama.2010.1181

[16] Cherry JD. Pertussis in Young Infants throughout the World. Clin Infect Dis. 2016 Dec 1; 63(Suppl 4): S119–S122. Published online 2016 Nov 2. doi: 10.1093/cid/ciw550.

Кариотипирование – что это такое и зачем оно нужно

Анализ на кариотип могут сделать люди, которые хотели бы проверить свое здоровье и своего будущего потомства. Современная медицина способна выявлять многие заболевания, в том числе и генетические. Несмотря на то что анализы, касающиеся ДНК, не являются обязательными, в некоторых случаях их желательно все же сдать. Своевременная диагностика позволит выработать защитные меры. В данной статье мы расскажем об одном из исследований, которое показано парам на этапе планирования беременности для выявления наследственных недугов.

Что это такое за процедура кариотипирование

Хромосомный набор человека влияет на его внешность, а также особенности функционирования организма. Его называют кариотипом. В случае если он не является стандартным, может развиться опасная патология. Генетические болезни невозможно вылечить, можно лишь несколько снизить их проявление. Чтобы понять, есть ли в ДНК поломки, делают специальный анализ. Для него берут венозную кровь. Результаты покажут совместимость мужа и жены, их способность к вынашиванию и рождению детей, вероятность того, насколько здоровым будет потомство.

Исследование не входит в список обязательных, его лишь рекомендуют. Многие пары сами принимают решение провериться, кому-то советует это сделать врач. Стоимость процедуры очень отличается в разных медицинских учреждениях, цена также зависит от количества мутаций, которые будут искать в лаборатории.

Для кого процедура необходима

Анализ рекомендуют делать людям, у которых повышены риски появления проблем. В частности, исследование может очень помочь в различных ситуациях.

Кому назначают

  • Если пара в возрасте после 35 лет хочет родить ребенка. Рекомендация действует даже если возрастной порог перешагнул только один из супругов. После 35 лет и дальше здоровье людей претерпевает изменения, оно может существенно ухудшиться. Те генетические аномалии, которые ранее спали в организме, часто активизируются, соответственно могут повлиять на беременность, вынашивание плода. Анализ крови на кариотип показывает, что эта ситуация вероятна в конкретном случае или нет.
  • При бесплодии, причины которого не получается установить. Бывает, что пара много лет работает над зачатием, но результата не получает. Если с гормонами и функциональностью половых органов все нормально, причина может быть в генетической несовместимости. Если это так, то пара никогда не сможет иметь общих детей. Это не значит, что супруги бесплодны. Иногда смена партнера может решить проблему. Иногда генетически бесплодным является только один из супругов. Тогда паре предлагают использовать для зачатия донорский репродуктивный материал.
  • После многократного ЭКО, прошедшего неуспешно. Экстракорпоральное оплодотворение никогда не гарантирует 100-процентной успешности, но если оно не помогает несколько, значит, у супругов серьезные проблемы со здоровьем. Вероятность того, что «виновата» плохая генетика, высока.
  • При наличии у мужа, жены или их родственников наследственного заболевания. Мутация, которая к нему привела, вполне могла передаться потомкам, но необязательно.
  • Если есть гормональные проблемы невыясненной природы у женщины.
  • Нарушение образования сперматозоидов, происходящее по неизвестным причинам.
  • Если пара проживает в регионе с неблагоприятной экологической обстановкой.
  • Если муж или жена работает с опасными химическими препаратами.
  • После радиационного, лучевого облучения и прохождения химиотерапии.
  • При наличии в прошлом замерших беременностей, выкидышей, родов, произошедших раньше времени. К этому приводит тромбизация в сосудах пуповины, что является следствием генной реверсии. В таком случае сохранить малыша помогут специальные медицинские препараты.
  • Если брак был заключен между близкими кровными родственниками. Очень вероятно совпадение хромосомной поломки, что приведет к тяжелым нарушениям у потомства.
  • Рождение в семье детей с врожденными патологиями. Если такое было, важно выяснить причины случившегося. Если они связаны с ДНК, то необходимо просчитать риски для следующего ребенка.

Как правило, анализ крови на кариотип проводят до наступления беременности, еще на стадии ее планирования. Это позволяет заранее просчитать все риски и определиться с дальнейшими действиями.

Если же зачатие уже произошло, исследование провести не поздно. Для него возьмут биологические образцы не только отца и матери, но и эмбриона. Это позволит выяснить вероятность успешного вынашивания, а также состояние здоровья плода.

Как проводится процедура

Кровь берут у обоих супругов, затем ее особым образом обрабатывают. Для начала отделяются лимфоциты. Их вычленяют на стадии деления (она называется митозом). Далее, клетки обрабатывают специальным веществом, которое стимулирует их размножение. Данный процесс и будут наблюдать специалисты, отмечая его правильность. На это уходит примерно 3–5 дней.

В ходе наблюдений хромосомы окрашивают. Это делают для того, чтобы хорошо видеть все фрагменты генома. В окрашенном виде они отлично заметны. Имеющиеся пары сравнивают с нормой. На основе этого составляется карта, по ней и судят о генетическом здоровье. Для такого исследования достаточно всего 12 максимум 15 лимфоцитов. Больше и не нужно, ведь кровяные клетки затем размножают в искусственных условиях.

Проведение теста

Контролю может быть подвергнута пара или ребенок. Это разные манипуляции, рассмотрим их ниже.

У супругов

Если муж и жена имеют печальный опыт неудачной беременности, вполне логично, что они хотят перепровериться перед следующим зачатием. В случае длительной бесплодности также стоит пройти кариотипирование клеток крови, что это даст практически, мы расскажем в одном из следующих разделов. Такой вид исследования биологической жидкости является традиционным. Существуют и более современные методики, позволяющие определить генетические риски. Это:

  • SKY. При данном анализе хромосомы окрашивают сразу в 24 цвета. Это позволяет определять даже те патологии, которые при использовании обычного метода не выявляются. Обследование делают в короткие сроки, что также является плюсом.
  • FISH. Захватывает огромное количество нарушений. Тест самый информативный из существующих. Во время его выполнения применяется флюоресцентное окрашивание. Культивирование клеток для получения результата не нужно, таким образом, сроки получения результата сокращаются. Для людей, которые не хотят ждать, самое то. Процедуру совершают и уже при наступившей беременности. Для манипуляции набирают материнскую венозную кровь или же отбирают генетический материал плода.

Первая методика не инвазивная, она более безопасна, так как никаким образом не затрагивает непосредственно ребенка. Вторая предполагает прокол матки (иным способом биологический материал не набрать). Это опасная процедура, положительный исход которой примерно 50 на 50. После такого вмешательства эмбрион может погибнуть прямо в утробе. Также есть вероятность того, что произойдет самопроизвольный выкидыш. Насколько целесообразен такой риск, решать родителям.

Проведение теста у новорожденных

Исследование делают в роддоме. Для него берут кровь у младенца. В случае обнаружения отклонений от нормы оповещаются родители. Им предлагают пройти полное генетическое обследование. От обследования в родильном доме можно отказаться. Прежде чем это сделать, стоит подумать, оправдан ли такой шаг. Многие нарушения ДНК явно дают о себе знать в самом раннем детстве.

Например, синдром Дауна заметен уже в роддоме невооруженным глазом. Обследоваться рекомендуют и старшим детям при наличии тревожащих симптомов. В частности, должно насторожить следующее:

  • Задержка умственного развития или физические нарушения, причина которых не выяснена. Бывает так, что с малышом не все в порядке, но томограммы, УЗИ головного мозга, всевозможные анализы показывают, что все должно быть нормально. В такой ситуации высока вероятность того, что причина состояния именно в геноме.
  • Задержка или ускорение полового развития.
  • Аномалия, которая заставляет сомневаться в половой принадлежности (Это называется гермафродитизм).

Проверить состояние ДНК можно в любом возрасте, противопоказаний к манипуляции нет.

Подготовка к сдаче анализа на кариотип

Для исследования нужны кровяные клетки. Важно, чтобы на момент забора они были в своем нормальном состоянии. Это обеспечит информативность результата. Чтобы показатели крови были максимально приближены к реальным, важно за две недели до сдачи не принимать никаких препаратов. Следует исключить не только лекарства, но и витамины, БАДы, пищевые добавки. Неинформативным будет тест, сделанный во время прохождения химиотерапии, ведь тяжелые препараты, использующиеся при этом, имеют свойство повреждать ДНК.

Также нежелательно на протяжении этого периода болеть. Если же кто-то из супругов подхватил инфекцию, то процедуру следует отложить. В этом нет ничего страшного. Лучше узнать точные результаты позже, чем поспешить и получить сомнительный ответ. Забор биологической жидкости проводится на сытый желудок. Эту особенность следует запомнить. Специалисты рекомендуют за час или два до манипуляции что-нибудь съесть.

Что показывает анализ на кариотип: для чего сдают

В ДНК человека присутствует 46 пар хромосом. К этому количеству добавляется половые – ХУ у женщин и ХХ у мужчин. В случае если в геноме произошла мутация, возможны различные вариации. Ученые изучили многие из них, что и позволило им диагностировать генетические заболевания.

Декодирование данных

Исследование кариотипа (что это, смотрите в предыдущих разделах) способно выявить следующие патологии:

  • Мозаицизм. Это явление, при котором клетки человеческого организма являются носителями разного генома.
  • Транслокацию. При ней обмениваются фрагментами.
  • Делецию. Это утеря частички генома. Чаще всего именно при такой мутации возникают серьезные нарушения.
  • Моносомия. Потеря одной целой пары.
  • Трисомия. Добавление лишней единицы. При такой мутации происходит, например, развитие синдрома Дауна.
  • Инверсия. При ней молекулы разворачиваются на 180 градусов. В такой ситуации они работают не так, как надо.

При составлении индивидуальной карты во внимание берут то, в какой паре произошла мутация. В частности, изменения в 21 по счету указывает на синдром Дауна, в 18 – Эдвардса.
Если повреждены половые пары, это, как правило, означает бесплодие (женское или мужское). Каждое из перечисленных отклонений бывает разных видов. Детальную расшифровку анализа кариотипирования может сделать специалист-генетик. Укороченная пятая хромосома провоцирует синдром кошачьего крика.

Помимо тяжелых нарушений, показывает предрасположенность к таким заболеваниям, как гипертония, суставные повреждения, сахарный диабет и другие. Такая информация будет не лишней. Зная, какие проблемы могут подстерегать малыша во взрослой жизни, можно подкорректировать его образ жизни, соответственно снизить риски. Иногда анализ показывает, что патологии нет, но есть риск ее появления у потомства, особенно если у мужа и жены совпадает склонность к какой-либо мутации. В таком случае к планированию рождения детей важно отнестись со всей ответственностью.

Что делать при отклонениях

Если подготовка к анализу кариотипирования была совершена правильно, результат будет информативный. Если он оказался хорошим, можно расслабиться и приступить к планированию крошки. К сожалению, бывает так, что патологии все же обнаруживают. В такой ситуации родители резонно задают себе вопрос: «А что же делать?». Все зависит от конкретной ситуации. Генетические поломки не лечатся, не устраняются полностью, но их проявления корректируются. В некоторых случаях можно победить даже бесплодие. Как женщине, так и мужчине назначают терапию, которая сможет помочь. (Представителям сильного пола предлагают попить препараты, нормализующие половую сферу. Среди них хорошо себя отметил Простатилен АЦ).

Если же попытки зачать ребенка оказались тщетными, супругам предлагают воспользоваться донорским генетическим материалом. При таком раскладе биологическим родителем станет кто-то один. Многие пары на это согласны. Если патология была выявлена у плода беременной, врачи консультируют, чем это чревато. Дальнейшее решение за родителями. Только они решают, рожать или нет неполноценного ребенка. Никто не имеет права склонять людей к определенному решению.

Заключение

Стоит отметить, что если анализ показал присутствие у эмбриона генетического нарушения, это не значит, что все потеряно. Беременной женщине назначать поддерживающую терапию, которая снизит к минимуму проявление проблемы. Также нужно будет оказать медицинскую помощь новорожденному. Специальные препараты, диета, особый образ жизни помогут улучшить состояние малыша до такой степени, что он будет практически не замечать патологий.

Если исследование показало лишь вероятность развития патологии, но не гарантию этого, у пары есть все шансы зачать и родить здорового малыша. Из данной статьи вы узнали, что это такое анализ на кариотип, как его сдавать. Надеемся, что подготовленный материал был познавательным и полезным. Смотрите также видео, в котором речь идет об этой же теме. Не бойтесь проходить обследование, берегите себя и свою семью.

Читайте также:  Когда и какой чай можно давать ребенку: зеленый и черный сорт, травяные напитки для грудничков
Оцените статью
Добавить комментарий